一、免疫熒光技術(shù)簡介
Coons等于1941年首次采用熒光素進(jìn)行標(biāo)記而獲得成功。這種以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)稱為熒光抗體技術(shù)（fluorescentantibodytechnique）。用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法；用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù)，因?yàn)闊晒馍�素不但能與抗體球蛋白結(jié)合，用于檢測或定位各種抗原，也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合，用于檢測或定位抗體，但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用，所以人們習(xí)慣稱為熒光抗體技術(shù)，或稱為免疫熒光技術(shù)。以熒光抗體方法較常用。[1]用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細(xì)胞（或組織）化學(xué)技術(shù)。

二、免疫熒光技術(shù)原理
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物，再用這種熒光抗體（或抗原）作為分子探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本，熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光（黃綠色或桔紅色），可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位，以及利用定量技術(shù)測定含量。

三、免疫熒光技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
詢價(jià)
服務(wù)周期
我公司在接受實(shí)驗(yàn)委托1~3周內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)并交付實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

四、免疫熒光技術(shù)服務(wù)技術(shù)步驟
① 固定：4%多聚甲醛，室溫固定20 min，PBS洗三次，每次3 min；
② 透膜：0.5% Triton X-100 in PBS，室溫10 min，PBS洗三次，每次3 min；
③ 封閉：1%BSA in PBS，室溫30 min，PBS洗一次，3 min；
④ 一抗：按照抗體說明書配制適當(dāng)比例的一抗，室溫1-2 h或4 ℃過夜，PBS洗三次，每次5 min；
⑤ 二抗：按照抗體說明書配制適當(dāng)比例的二抗，室溫1-2 h，PBS洗三次，每次5 min；
⑥ 細(xì)胞核染色：1 μg/mL DAPI，室溫10 min，PBS洗三次，每次5 min；
⑦ 封片：2-3 μL抗淬滅劑封片。
⑧ 觀察：用熒光顯微鏡觀察結(jié)果。 

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